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                  GADAb試劑盒樣品收集,處理及保存方法
                  發布時間:2022-03-28   點擊次數:89次
                    GADAb試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)往預先包被人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
                    GADAb試劑盒樣品收集,處理及保存方法:
                    1.血清:使用不含熱源和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,采集血液后3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心的分離。
                    2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,3000轉離心30分鐘取上清。
                    3.細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
                    4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
                    5.保存:如果樣本采集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻的充分解凍。
                    GADAb試劑盒操作注意事項:
                    1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱時結晶完全溶解后再使用。
                    2.實驗中不用他的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
                    3.標準品稀釋液即可視為應性對照或者空白,預處理后的樣本無需稀釋,直接取10u1加樣即可。
                    4.嚴格按照說明書中表明的時間,加樣量及順序進行溫育操作。
                    5.所有液體組分使用前充分搖勻。
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