糖尿病抗體ELISA檢測試劑盒

　　糖尿病抗體ELISA檢測試劑盒說明書

　　1.糖尿病抗體ELISA檢測試劑盒預期用途：

　　RSR 公司的 GAD65 自身抗體（GAD Ab）ELISA 試劑盒僅用于定量檢測人血清中的 GAD

　　自身抗體，需專業技術人員操作。胰島β細胞自身抗體是 I 型糖尿?。ㄒ恍?DM）重要的血清標志物，該抗體可以識別以下抗原，包括胰島素，谷氨酸脫羧酶，胰島細胞抗原 IA-2 或者 ICA-512 和鋅轉運蛋白 8（ZnT8）。

　　2.谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒檢測原理：

　　在 RSR 的 GAD 自身抗體 ELISA 檢測方法中，患者血清，標準品和質控品中的 GAD 抗體，

　　可以經 1 小時孵育和微孔板上包被的 GAD65 結合，然后洗板。在第二步孵育期間加入-生

　　物素標記的 GAD65，這樣 GAD 抗體就在 GAD65 與 GAD65-生物素之間就形成一個橋梁。

　　結合的 GAD65-生物素的數量是由第三步加入的鏈霉親和素—過氧化物酶的量決定，因為它

　　能與 GAD65-生物素特異性的結合。洗去未結合的鏈霉親和素—過氧化物酶，加入 TMB，

　　形成藍色復合物。加入終止劑終止反應，微孔板由藍色變為黃色。在波長 450nm 和 405nm

　　讀取吸光度。當吸光度較高表示樣本中的 GAD 自身抗體含量較高。當吸光度較高建議在

　　405nm 讀數（200U/ml 以上），當吸光度較低建議在 450nm 讀數（低于 10U/ml 以上）。檢

　　谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒測范圍為 5-2000U/ml

　　3.受試樣本要求及貯存

　　待檢標本應立即分離出血清進行檢測，或-20℃分裝保存，盡量避免反復凍融，防止儲存溫

　　度過高。每份樣本需要 50μl 血清（每孔 25μl，實驗建議進行復孔）避免使用脂血、溶血

　　的樣本，不宜使用血漿進行檢測。

　　需要時， 在室溫下解凍測試血清并輕輕混勻。

　　檢測前用離心機分離血清（推薦速度：10-15，000g，離心 5 分鐘）去除微粒物質。當血

清渾濁或有顆粒時，請勿省略離心處理步驟。